微生物检验标本的采集
一.细菌（培养）标本采集的基本原则
1.发现感染应及时采集微生物标本做病原学检查；
2.早期采集。采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，而且最好在使用抗菌药物之前采集；
3.无菌采集。标本采集时应严格无菌操作，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染；
4.采集的标本均应盛于无菌容器内，盛标本的容器须灭菌或用一次性无菌容器，而不能用消毒剂或酸类处理的容器；
5.安全采集。采集标本时不仅要防止皮肤黏膜正常菌群对标本的污染，同时也要注意安全，防止传播和自身感染；
6.用棉拭子采集的标本应注意保湿，宜插入运送培养基送检；
7.送检标本应注明来源和检验目的，微生物室才能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
二.标本类型及采集方法
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标本类型 |
采集和运送方法 |
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血液 |
为诊断菌血症或败血症时采集。一般尽量在使用抗生素之前（若用了抗生素，应告知本检验所，可使用专用的“中和抗生素血培养瓶”采集），病人发热初期和高峰期采血（静脉采血）。成人5～10ml/瓶；婴幼儿及儿童1～4ml/瓶，严格按照无菌操作抽血注入专用的血培养瓶中（注意：血培养瓶内部的隔膜盖并非无菌的，注入前和注入后瓶盖都要消毒）。尽快将血培养瓶送至细菌室，如有耽搁，室温放置，注意千万别冷藏。 |
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尿液 |
常采用中段尿。采集时应先用中性肥皂水和清水清洁外阴部（或尿道口）4～5次（男性应翻转包皮冲洗），弃去前段部分尿，留取中段尿于专用无菌容器内，加盖送检。另外膀胱穿刺法（以针筒由耻骨上方经皮刺入膀胱，再以针筒吸取尿液，盛于无菌试管中直接送检）是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。 |
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痰液 |
以清晨第一口痰为宜。取之前先用清水漱口，并嘱病人用力从气管深部咳出痰吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏的广口带盖容器内，尽快送检。无痰患者可用雾化吸入加温至45℃左右的15% NaCl 和10% 甘油溶液，诱导使之吐痰，10～15分钟即可采集痰液。危重患者可通过吸痰或采用支气管肺泡灌洗液。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。做结核分枝杆菌检查，痰量要多或留取24h痰液。 |
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粪便/肛或直肠拭子 |
腹泻患者应在急性期并尽可能在使用抗菌药物前采集新鲜粪便（伤寒患者在发病2周以后），留取脓血或粘液部分的粪便置清洁容器中送检，或用消毒棉拭子沾取待检部分后插入专用的含保存液无菌试管送检；疑似霍乱弧菌者则应留取米泔样便或水样便及时送检并注明。 |
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创伤、组织、脓肿标本 |
开放性感染和已溃破的化脓灶采集前先用灭菌生理盐水拭去表面渗出物，尽可能用无菌棉拭子深入伤口采集标本；封闭性脓肿局部消毒后用针及注射器抽吸脓肿壁，将所有物质置于无菌试管内送检，疑为厌氧菌感染时立即置于厌氧转运装置送检（针头插一橡皮塞隔绝空气）；创伤范围大时应多部位采集，可取感染组织块或沾有脓汁的内层敷料并置于无菌试管内立即送检。 |
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穿刺液标本 |
脑脊液用腰穿方法采集3～5ml，一般放入3个无菌试管，每个试管内1～2ml,用于检测细菌应≥1ml,如果用于检测真菌或抗酸杆菌，应≥2ml；胸腹水及其他穿刺液用针穿刺法按无菌操作抽取2～5ml注入无菌试管内立即送检。 |
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生殖道分泌物 |
建议使用塑料杆的涤纶拭子（竹棉拭子含有树脂和甲醛等对细菌生长有抑制作用而不适于细菌学标本的采集）男性患者清洗尿道口，取从尿道口溢出的脓性分泌物或无菌拭子从尿道内2～4cm处取出分泌物；女性患者清洗阴部后用无菌拭子采集分泌物或用拭子插入宫颈管1～2cm，转动并停留10～30s，以充分吸附分泌物。注意若做淋球菌培养一定放入淋球菌专用运送培养基内尽快送至细菌室，如有耽搁，室温放置，注意千万别冷藏。前列腺培养，可在前列腺按摩后收集标本（棉拭子沾取或直接滴入培养平板）立即送检。 |
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空气中细菌监测 |
监测院内感染的重要内容之一，具体做法：①布点方法：室内面积≤30m2,设内、中、外对角线3点，室内面积＞30m2，设四角及中央5点，四角的布点部位为距墙壁1m处②采样方法:打开用于空气培养的平板置于各采样点处,采样高度为距地面1.5米高处，暴露5分钟，盖好盖，立即送细菌室培养。 |
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物体表面细菌污染监测 |
用5*5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后投入本检验所提供的含培养液的灭菌试管内送检。 |
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医护人员手/皮肤细菌污染监测 |
手的采样：被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后投入本检验所提供的含培养液的灭菌试管内送检。
皮肤黏膜采样同物体表面细菌污染监测，不规则的皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。 |
三.采集及运送注意事项
1.采集时间：应在疾病早期、急性期、症状典型或用药之前采集标本；
2.根据不同目的采用不同的采集方法；
3.除痰、大便、肛拭子等体外标本，其他标本采集时应用无菌操作，采集量亦不可过少；
4.采集和运送时应注意安全、防止污染及交叉感染；
5.血培养瓶、脑脊液、淋病奈瑟菌/脑膜炎奈瑟菌培养的标本应尽快送至细菌室，如有耽搁，室温放置，注意禁止冷藏。
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